The purpose of this study was to optimise the HPLC-UV bio-analytical method currently used by the Salamanca University Clinical Hospital for determining lamotrigine plasma levels.
Material and methodsThe developed HPLC-UV analytic technique currently in use was shown to be linear, exact and precise, and suitable for use in routine monitoring of lamotrigine levels. The drawback of this method has always been the time required for analysing samples, so our aim was to improve on that elapsed time.
That improvement involved using a different chromatographic column from the one used up until now. We replaced the column that was normally used (Kromasil−100C18−5μm−15*0.4cm with a LiChroCART-RP18e−3μm−5.5*0.4cm); in both cases, a liquid-liquid extraction was performed and the same sample extraction protocol was followed.
ResultsBoth validation methods showed that the two column types are valid for routine lamotrigine monitoring.
ConclusionThe decrease in retention time, in addition to a lower quantification limit and better precision and accuracy parameters obtained with the LiChorCART column, suggest that this unit is ideal for use in clinical practice because it enables a large number of determinations to be performed in less time and the greater precision of LTG measurements.
Optimizar el método bioanalítico HPLC-UV empleado hasta el momento en el Hospital Clínico Universitario de Salamanca, para la determinación de los niveles plasmáticos de la lamotrigina (LTG).
Material y métodosLa técnica analítica de HPLC-UV desarrollada y utilizada hasta el momento demostró ser lineal, exacta y precisa, siendo apta para su empleo en la monitorización rutinaria de la LTG. Sin embargo, presentaba un prolongado tiempo para el análisis de las muestras, por lo que se optó por una mejora en la misma. Dicha mejora consistió en el empleo de una columna cromatográfica alternativa a la usada hasta el momento. Para ello se sustituyó la habitualmente empleada (Kromasil-100C18 − 5μm − 15×0,4cm por la LiChroCART-RP18e − 3 μm − 5,5×0,4cm) realizando en ambos casos una extracción líquido-líquido y siguiendo el mismo protocolo de extracción de muestra.
ResultadosAmbas validaciones demostraron que los dos tipos de columnas son válidos para la monitorización rutinaria de la LTG.
ConclusiónLa disminución en el tiempo de retención, junto con el menor límite de cuantificación y los mejores parámetros de precisión y exactitud obtenidos con la columna LiChorCART, sugieren a ésta como una candidata ideal para la práctica clínica debido al gran número de determinaciones que pueden realizarse en un menor tiempo y la mayor precisión en la cuantificación de la LTG.
